• 【發(fā)布單位】國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會辦公廳 國家食品藥品監(jiān)督管理總局辦公廳
• 【發(fā)布文號】國衛(wèi)辦科教發(fā)〔2015〕46號
• 【發(fā)布日期】2015-07-31
• 【生效日期】2015-07-31
• 【失效日期】--
• 【文件來源】國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會辦公廳
• 【所屬類別】政策參考

關(guān)于印發(fā)干細(xì)胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則（試行）的通知

關(guān)于印發(fā)干細(xì)胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則（試行）的通知 
國衛(wèi)辦科教發(fā)〔2015〕46號
各省、自治區(qū),、直轄市衛(wèi)生計(jì)生委,、食品藥品監(jiān)管局，新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)衛(wèi)生局,、食品藥品監(jiān)管局,，國家衛(wèi)生計(jì)生委直屬有關(guān)單位，食品藥品監(jiān)管總局直屬有關(guān)單位：
        為加強(qiáng)我國干細(xì)胞制劑和臨床研究質(zhì)量管理,，國家衛(wèi)生計(jì)生委與食品藥品監(jiān)管總局根據(jù)《干細(xì)胞臨床研究管理辦法（試行）》，共同組織制定了《干細(xì)胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則（試行）》（可從國家衛(wèi)生計(jì)生委或食品藥品監(jiān)管總局網(wǎng)站下載）?，F(xiàn)印發(fā)給你們,，請遵照執(zhí)行。
 
國家衛(wèi)生計(jì)生委辦公廳
食品藥品監(jiān)管總局辦公廳
2015年7月31日
 
干細(xì)胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則
（試行）
 
 一,、前言
 二,、干細(xì)胞制劑的質(zhì)量控制
 （一）干細(xì)胞的采集、分離及干細(xì)胞（系）的建立
 （二）干細(xì)胞制劑的制備
 （三）干細(xì)胞制劑的檢驗(yàn)
 （四）干細(xì)胞制劑的質(zhì)量研究
 三,、干細(xì)胞制劑的臨床前研究
 （一）安全性評價(jià)
 （二）有效性評價(jià)
 名詞解釋
 參考文獻(xiàn)
 
 
 一.前言
 干細(xì)胞是一類具有不同分化潛能,，并在非分化狀態(tài)下自我更新的細(xì)胞。干細(xì)胞治療是指應(yīng)用人自體或異體來源的干細(xì)胞經(jīng)體外操作后輸入（或植入）人體,，用于疾病治療的過程,。這種體外操作包括干細(xì)胞的分離,、純化、擴(kuò)增,、修飾,、干細(xì)胞（系）的建立、誘導(dǎo)分化,、凍存和凍存后的復(fù)蘇等過程,。用于細(xì)胞治療的干細(xì)胞主要包括成體干細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞及誘導(dǎo)的多能性干細(xì)胞（iPSC）,。成體干細(xì)胞包括自體或異體,、胎兒或成人不同分化組織，以及發(fā)育相伴隨的組織（如臍帶,、羊膜,、胎盤等）來源的造血干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞,、各種類型的祖細(xì)胞或前體細(xì)胞等,。
 目前國內(nèi)外已開展了多項(xiàng)干細(xì)胞（指非造血干細(xì)胞）臨床應(yīng)用研究，涉及多種干細(xì)胞類型及多種疾病類型,。主要疾病類型包括骨關(guān)節(jié)疾病,、肝硬化、移植物宿主排斥反應(yīng)（GVHD）,、脊髓損傷及退行性神經(jīng)系統(tǒng)疾病和糖尿病等,。其中許多干細(xì)胞類型，是從骨髓,、脂肪組織,、臍帶血、臍帶或胎盤組織來源的間充質(zhì)干細(xì)胞,，它們具有一定的多向分化潛能及抗炎和免疫調(diào)控能力等,。
 用于干細(xì)胞治療的細(xì)胞制備技術(shù)和治療方案，具有多樣性,、復(fù)雜性和特殊性,。但作為一種新型的生物治療產(chǎn)品，所有干細(xì)胞制劑都可遵循一個(gè)共同的研發(fā)過程,，即從干細(xì)胞制劑的制備,、體外試驗(yàn)、體內(nèi)動(dòng)物試驗(yàn),，到植入人體的臨床研究及臨床治療的過程,。整個(gè)過程的每一階段，都須對所使用的干細(xì)胞制劑在細(xì)胞質(zhì)量,、安全性和生物學(xué)效應(yīng)方面進(jìn)行相關(guān)的研究和質(zhì)量控制,。
 本指導(dǎo)原則提出了適用于各類可能應(yīng)用到臨床的干細(xì)胞（除已有規(guī)定的造血干細(xì)胞移植外）在制備和臨床前研究階段的基本原則,。每個(gè)具體干細(xì)胞制劑的制備和使用過程，必須有嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)操作程序并按其執(zhí)行,，以確保干細(xì)胞制劑的質(zhì)量可控性以及治療的安全性和有效性,。每一研究項(xiàng)目所涉及的具體干細(xì)胞制劑，應(yīng)根據(jù)本指導(dǎo)原則對不同階段的基本要求,，結(jié)合各自干細(xì)胞制劑及適應(yīng)證的特殊性,，準(zhǔn)備并實(shí)施相關(guān)的干細(xì)胞臨床前研究。
 二.干細(xì)胞制劑的質(zhì)量控制
 （一）干細(xì)胞的采集,、分離及干細(xì)胞（系）的建立
 1.對干細(xì)胞供者的要求
 每一干細(xì)胞制劑都須具有包括供者信息在內(nèi)的,、明確的細(xì)胞制備及生物學(xué)性狀信息。作為細(xì)胞制備信息中的重要內(nèi)容之一,，需提供干細(xì)胞的獲取方式和途徑以及相關(guān)的臨床資料,，包括供者的一般信息、既往病史,、家族史等,。既往史和家族史要對遺傳病(單基因和多基因疾病,包括心血管疾病和腫瘤等）相關(guān)信息進(jìn)行詳細(xì)采集。對用于異體干細(xì)胞臨床研究的供者,，必須經(jīng)過檢驗(yàn)篩選證明無人源特定病毒（包括HIV,、HBV、HCV,、HTLV,、EBV、CMV等）的感染,，無梅毒螺旋體感染,。必要時(shí)需要收集供者的ABO血型、HLA-I類和II類分型資料,，以備追溯性查詢,。如使用體外授精術(shù)產(chǎn)生的多余胚胎作為建立人類胚胎干細(xì)胞系的主要來源，須能追溯配子的供體,，并接受篩選和檢測,。不得使用既往史中患有嚴(yán)重的傳染性疾病和家族史中有明確遺傳性疾病的供者作為異體干細(xì)胞來源。
 自體來源的干細(xì)胞供者,，根據(jù)干細(xì)胞制劑的特性、來源的組織或器官,，以及臨床適應(yīng)證,，可對供體的質(zhì)量要求和篩查標(biāo)準(zhǔn)及項(xiàng)目進(jìn)行調(diào)整。
 2.干細(xì)胞采集,、分離及干細(xì)胞（系）建立階段質(zhì)量控制的基本要求
 應(yīng)制定干細(xì)胞采集,、分離和干細(xì)胞（系）建立的標(biāo)準(zhǔn)操作及管理程序,，并在符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（GMP）要求基礎(chǔ)上嚴(yán)格執(zhí)行。標(biāo)準(zhǔn)操作程序應(yīng)包括操作人員培訓(xùn),；材料,、儀器、設(shè)備的使用和管理,；干細(xì)胞的采集,、分離、純化,、擴(kuò)增和細(xì)胞（系）的建立,；細(xì)胞保存、運(yùn)輸及相關(guān)保障措施,，以及清潔環(huán)境的標(biāo)準(zhǔn)及常規(guī)維護(hù)和檢測等,。
 為盡量減少不同批次細(xì)胞在研究過程中的變異性，研究者在干細(xì)胞制劑的制備階段應(yīng)對來源豐富的同一批特定代次的細(xì)胞建立多級的細(xì)胞庫,，如主細(xì)胞庫（Master Cell Bank)和工作細(xì)胞庫（Working Cell Bank）,。細(xì)胞庫中細(xì)胞基本的質(zhì)量要求，是需有明確的細(xì)胞鑒別特征,，無外源微生物污染,。
 在干細(xì)胞的采集、分離及干細(xì)胞（系）建立階段,，應(yīng)當(dāng)對自體來源的,、未經(jīng)體外復(fù)雜操作的干細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞鑒別,、成活率及生長活性,、外源致病微生物，以及基本的干細(xì)胞特性檢測,。而對異體來源的干細(xì)胞,，或經(jīng)過復(fù)雜的體外培養(yǎng)和操作后的自體來源的干細(xì)胞，以及直接用于臨床前及臨床研究的細(xì)胞庫（如工作庫）中的細(xì)胞,，除進(jìn)行上述檢測外,，還應(yīng)當(dāng)進(jìn)行全面的內(nèi)外源致病微生物、詳細(xì)的干細(xì)胞特性檢測,，以及細(xì)胞純度分析,。干細(xì)胞特性包括特定細(xì)胞表面標(biāo)志物群、表達(dá)產(chǎn)物和分化潛能等,。
 （二）干細(xì)胞制劑的制備
 1.培養(yǎng)基
 干細(xì)胞制劑制備所用的培養(yǎng)基成分應(yīng)有足夠的純度并符合無菌,、無致病微生物及內(nèi)毒素的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),殘留的培養(yǎng)基對受者應(yīng)無不良影響；在滿足干細(xì)胞正常生長的情況下，不影響干細(xì)胞的生物學(xué)活性,，即干細(xì)胞的“干性”及分化能力,。在干細(xì)胞制劑制備過程中，應(yīng)盡量避免使用抗生素,。
 若使用商業(yè)來源培養(yǎng)基,，應(yīng)當(dāng)選擇有資質(zhì)的生產(chǎn)商并由其提供培養(yǎng)基的組成成分及相關(guān)質(zhì)量合格證明。必要時(shí),，應(yīng)對每批培養(yǎng)基進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn),。
 除特殊情況外，應(yīng)盡可能避免在干細(xì)胞培養(yǎng)過程中使用人源或動(dòng)物源性血清,，不得使用同種異體人血清或血漿,。如必須使用動(dòng)物血清，應(yīng)確保其無特定動(dòng)物源性病毒污染,。嚴(yán)禁使用海綿體狀腦病流行區(qū)來源的牛血清,。
 若培養(yǎng)基中含有人的血液成份，如白蛋白,、轉(zhuǎn)鐵蛋白和各種細(xì)胞因子等,，應(yīng)明確其來源、批號,、質(zhì)量檢定合格報(bào)告,，并盡量采用國家已批準(zhǔn)的可臨床應(yīng)用的產(chǎn)品。
 2.滋養(yǎng)層細(xì)胞
 用于體外培養(yǎng)和建立胚胎干細(xì)胞及iPS細(xì)胞的人源或動(dòng)物源的滋養(yǎng)層細(xì)胞,，需根據(jù)外源性細(xì)胞在人體中使用所存在的相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)因素,，對細(xì)胞來源的供體、細(xì)胞建立過程引入外源致病微生物的風(fēng)險(xiǎn)等進(jìn)行相關(guān)的檢驗(yàn)和質(zhì)量控制,。建議建立滋養(yǎng)層細(xì)胞的細(xì)胞庫,，并按細(xì)胞庫檢驗(yàn)要求進(jìn)行全面檢驗(yàn)，特別是對人源或動(dòng)物源特異病毒的檢驗(yàn),。
 3.干細(xì)胞制劑的制備工藝
 應(yīng)制定干細(xì)胞制劑制備工藝的標(biāo)準(zhǔn)操作流程及每一過程的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）并定期審核和修訂,；干細(xì)胞制劑的制備工藝包括干細(xì)胞的采集、分離,、純化,、擴(kuò)增和傳代，干細(xì)胞（系）的建立,、向功能性細(xì)胞定向分化,，培養(yǎng)基、輔料和包材的選擇標(biāo)準(zhǔn)及使用,，細(xì)胞凍存,、復(fù)蘇、分裝和標(biāo)記，以及殘余物去除等,。從整個(gè)制劑的制備過程到輸入（或植入）到受試者體內(nèi)全過程，需要追蹤觀察并詳細(xì)記錄,。對不合格并需要丟棄的干細(xì)胞制劑,，需對丟棄過程進(jìn)行規(guī)范管理和記錄。對于剩余的干細(xì)胞制劑必須進(jìn)行合法和符合倫理要求的處理,，包括制定相關(guān)的SOP并嚴(yán)格執(zhí)行,。干細(xì)胞制劑的相關(guān)資料需建檔并長期保存。
 應(yīng)對制劑制備的全過程,，包括細(xì)胞收獲,、傳代、操作,、分裝等,，進(jìn)行全面的工藝研究和驗(yàn)證，制定合適的工藝參數(shù)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),，確保對每一過程的有效控制,。
 （三）干細(xì)胞制劑的檢驗(yàn)
 1.干細(xì)胞制劑質(zhì)量檢驗(yàn)的基本要求
 為確保干細(xì)胞治療的安全性和有效性，每批干細(xì)胞制劑均須符合現(xiàn)有干細(xì)胞知識和技術(shù)條件下全面的質(zhì)量要求,。制劑的檢驗(yàn)內(nèi)容,，須在本指導(dǎo)原則的基礎(chǔ)上，參考國內(nèi)外有關(guān)細(xì)胞基質(zhì)和干細(xì)胞制劑的質(zhì)量控制指導(dǎo)原則,，進(jìn)行全面的細(xì)胞質(zhì)量,、安全性和有效性的檢驗(yàn)。同時(shí),，根據(jù)細(xì)胞來源及特點(diǎn),、體外處理程度和臨床適應(yīng)證等不同情況，對所需的檢驗(yàn)內(nèi)容做必要調(diào)整,。另外,，隨著對干細(xì)胞知識和技術(shù)認(rèn)識的不斷增加，細(xì)胞檢驗(yàn)內(nèi)容也應(yīng)隨之不斷更新,。
 針對不同類型的干細(xì)胞制劑,，根據(jù)對輸入或植入人體前誘導(dǎo)分化的需求，須對未分化細(xì)胞和終末分化細(xì)胞分別進(jìn)行必要的檢驗(yàn),。對胚胎干細(xì)胞和iPS細(xì)胞制劑制備過程中所使用的滋養(yǎng)細(xì)胞,，根據(jù)其細(xì)胞來源，也需進(jìn)行針對相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)因素的質(zhì)量控制和檢驗(yàn),。
 為確保制劑的質(zhì)量及其可控性,干細(xì)胞制劑的檢驗(yàn)可分為質(zhì)量檢驗(yàn)和放行檢驗(yàn),。質(zhì)量檢驗(yàn)是為保證干細(xì)胞經(jīng)特定體外處理后的安全性、有效性和質(zhì)量可控性而進(jìn)行的較全面質(zhì)量檢驗(yàn)。放行檢驗(yàn)是在完成質(zhì)量檢驗(yàn)的基礎(chǔ)上,，對每一類型的每一批次干細(xì)胞制劑,，在臨床應(yīng)用前所應(yīng)進(jìn)行的相對快速和簡化的細(xì)胞檢驗(yàn)。
 為確保制劑工藝和質(zhì)量的穩(wěn)定性,，須對多批次干細(xì)胞制劑進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn),；在制備工藝、場地或規(guī)模等發(fā)生變化時(shí),，需重新對多批次干細(xì)胞制劑進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn),。制劑的批次是指由同一供體、同一組織來源,、同一時(shí)間,、使用同一工藝采集和分離或建立的干細(xì)胞。對胚胎干細(xì)胞或iPS細(xì)胞制劑,，應(yīng)當(dāng)視一次誘導(dǎo)分化所獲得的可供移植的細(xì)胞為同一批次制劑,。對需要由多個(gè)供體混合使用的干細(xì)胞制劑，混合前應(yīng)視每一獨(dú)立供體或組織來源在相同時(shí)間采集的細(xì)胞為同一批次細(xì)胞,。
 對于由不同供體或組織來源的,、需要混合使用的干細(xì)胞制劑，需對所有獨(dú)立來源的細(xì)胞質(zhì)量進(jìn)行檢驗(yàn),，以盡可能避免混合細(xì)胞制劑可能具有的危險(xiǎn)因素,。
 2.細(xì)胞檢驗(yàn)
 2.1 質(zhì)量檢驗(yàn)
 （1）細(xì)胞鑒別
 應(yīng)當(dāng)通過細(xì)胞形態(tài)、遺傳學(xué),、代謝酶亞型譜分析,、表面標(biāo)志物及特定基因表達(dá)產(chǎn)物等檢測，對不同供體及不同類型的干細(xì)胞進(jìn)行綜合的細(xì)胞鑒別,。
 （2）存活率及生長活性
采用不同的細(xì)胞生物學(xué)活性檢測方法,，如活細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞倍增時(shí)間,、細(xì)胞周期,、克隆形成率、端粒酶活性等,，判斷細(xì)胞活性及生長狀況,。
 （3）純度和均一性
 通過檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物、遺傳多態(tài)性及特定生物學(xué)活性等,，對制劑進(jìn)行細(xì)胞純度或均一性的檢測,。對胚胎干細(xì)胞及iPS細(xì)胞植入人體前的終末誘導(dǎo)分化產(chǎn)物，必須進(jìn)行細(xì)胞純度和/或分化均一性的檢測,。
 對于需要混合使用的干細(xì)胞制劑,，需對各獨(dú)立細(xì)胞來源之間細(xì)胞表面標(biāo)志物,、細(xì)胞活性、純度和生物學(xué)活性均一性進(jìn)行檢驗(yàn)和控制,。
 （4）無菌試驗(yàn)和支原體檢測
 應(yīng)依據(jù)現(xiàn)行版《中華人民共和國藥典》中的生物制品無菌試驗(yàn)和支原體檢測規(guī)程,，對細(xì)菌、真菌及支原體污染進(jìn)行檢測,。
 （5）細(xì)胞內(nèi)外源致病因子的檢測
 應(yīng)結(jié)合體內(nèi)和體外方法,，根據(jù)每一細(xì)胞制劑的特性進(jìn)行人源及動(dòng)物源性特定致病因子的檢測。如使用過牛血清,，須進(jìn)行牛源特定病毒的檢測；如使用胰酶等豬源材料,，應(yīng)至少檢測豬源細(xì)小病毒,；如胚胎干細(xì)胞和iPS細(xì)胞在制備過程中使用動(dòng)物源性滋養(yǎng)細(xì)胞，需進(jìn)行細(xì)胞來源相關(guān)特定動(dòng)物源性病毒的全面檢測,。另外還應(yīng)檢測逆轉(zhuǎn)錄病毒,。
 （6）內(nèi)毒素檢測
 應(yīng)依據(jù)現(xiàn)行版《中華人民共和國藥典》中的內(nèi)毒素檢測規(guī)程，對內(nèi)毒素進(jìn)行檢測,。
 （7）異常免疫學(xué)反應(yīng)
 檢測異體來源干細(xì)胞制劑對人總淋巴細(xì)胞增殖和對不同淋巴細(xì)胞亞群增殖能力的影響,，或?qū)ο嚓P(guān)細(xì)胞因子分泌的影響，以檢測干細(xì)胞制劑可能引起的異常免疫反應(yīng),。
 （8）致瘤性
 對于異體來源的干細(xì)胞制劑或經(jīng)體外復(fù)雜操作的自體干細(xì)胞制劑,，須通過免疫缺陷動(dòng)物體內(nèi)致瘤試驗(yàn)，檢驗(yàn)細(xì)胞的致瘤性,。 
 （9）生物學(xué)效力試驗(yàn)
 可通過檢測干細(xì)胞分化潛能,、誘導(dǎo)分化細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和生理功能、對免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)能力,、分泌特定細(xì)胞因子,、表達(dá)特定基因和蛋白等功能，判斷干細(xì)胞制劑與治療相關(guān)的生物學(xué)有效性,。
 對間充質(zhì)干細(xì)胞,，無論何種來源，應(yīng)進(jìn)行體外多種類型細(xì)胞（如成脂肪細(xì)胞,、成軟骨細(xì)胞,、成骨細(xì)胞等）分化能力的檢測，以判斷其細(xì)胞分化的多能性（Multipotency）,。對未分化的胚胎干細(xì)胞和iPS細(xì)胞,，須通過體外擬胚胎體形成能力，或在SCID鼠體內(nèi)形成畸胎瘤的能力,，檢測其細(xì)胞分化的多能性（Pluripotency）,。除此以外,，作為特定生物學(xué)效應(yīng)試驗(yàn)，應(yīng)進(jìn)行與其治療適應(yīng)證相關(guān)的生物學(xué)效應(yīng)檢驗(yàn),。
 （10）培養(yǎng)基及其他添加成分殘余量的檢測
 應(yīng)對制劑制備過程中殘余的,、影響干細(xì)胞制劑質(zhì)量和安全性的成分，如牛血清蛋白,、抗生素,、細(xì)胞因子等進(jìn)行檢測。
 2.2 放行檢驗(yàn)
 項(xiàng)目申請者應(yīng)根據(jù)上述質(zhì)量檢驗(yàn)各項(xiàng)目中所明確的檢驗(yàn)內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn),，針對每一類型干細(xì)胞制劑的特性,，制定放行檢驗(yàn)項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)。放行檢驗(yàn)項(xiàng)目應(yīng)能在相對短的時(shí)間內(nèi),，反映細(xì)胞制劑的質(zhì)量及安全信息,。
 3.干細(xì)胞制劑的質(zhì)量復(fù)核
 由專業(yè)細(xì)胞檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)/實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行干細(xì)胞制劑的質(zhì)量復(fù)核檢驗(yàn)，并出具檢驗(yàn)報(bào)告,。
 （四）干細(xì)胞制劑的質(zhì)量研究
 在滿足上述干細(xì)胞制劑質(zhì)量檢驗(yàn)要求的基礎(chǔ)上,，建議在臨床前和臨床研究各階段，利用不同的體外實(shí)驗(yàn)方法對干細(xì)胞制劑進(jìn)行全面的安全性,、有效性及穩(wěn)定性研究,。
 1.干細(xì)胞制劑的質(zhì)量及特性研究
 1.1 生長活性和狀態(tài)
 生長因子依賴性的檢測：在培養(yǎng)生長因子依賴性的干細(xì)胞時(shí)，需對細(xì)胞生長行為進(jìn)行連續(xù)檢測,，以判斷不同代次的細(xì)胞對生長因子的依賴性,。若細(xì)胞在傳代過程中，特別是在接近高代次時(shí),，失去對生長因子的依賴,，則不能再繼續(xù)將其視為合格的干細(xì)胞而繼續(xù)培養(yǎng)和使用。
 1.2 致瘤性和促瘤性
 由于大多數(shù)間充質(zhì)干細(xì)胞制劑具有相對的弱致瘤性,，建議在動(dòng)物致瘤性試驗(yàn)中,，針對不同類型的干細(xì)胞，選擇必要數(shù)量的細(xì)胞和必要長的觀察期,。
 在動(dòng)物致瘤性試驗(yàn)不能有效判斷致瘤性時(shí),，建議檢測與致瘤性相關(guān)的生物學(xué)性狀的改變，如細(xì)胞對生長因子依賴性的改變,、基因組穩(wěn)定性的改變,、與致瘤性密切相關(guān)的蛋白（如癌變信號通路中的關(guān)鍵調(diào)控蛋白）表達(dá)水平或活性的改變、對凋亡誘導(dǎo)敏感性的改變等,，以此來間接判斷干細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的可能性,。
 目前，普遍認(rèn)為間充質(zhì)干細(xì)胞“不致瘤”或具有“弱致瘤性”,，但不排除其對已存在腫瘤的“促瘤性”作用,。因此,，建議根據(jù)各自間充質(zhì)干細(xì)胞制劑的組織來源和臨床適應(yīng)證的不同，設(shè)計(jì)相應(yīng)的試驗(yàn)方法,，以判斷其制劑的“促瘤性”,。
 1.3 生物學(xué)效應(yīng)
 隨著研究的進(jìn)展，建議針對臨床治療的適應(yīng)證,，不斷研究更新生物學(xué)效應(yīng)檢測方法,。如研究介導(dǎo)臨床治療效應(yīng)的關(guān)鍵基因或蛋白的表達(dá)，并以此為基礎(chǔ)提出與預(yù)期的生物學(xué)效應(yīng)相關(guān)的替代性生物標(biāo)志物（Surrogate Biomarker）,。
 2.干細(xì)胞制劑穩(wěn)定性研究及有效期的確定
 應(yīng)進(jìn)行干細(xì)胞制劑在儲存（液氮凍存和細(xì)胞植入前的臨時(shí)存放）和運(yùn)輸過程中的穩(wěn)定性研究,。檢測項(xiàng)目應(yīng)包括細(xì)胞活性、密度,、純度,、無菌性等。
 根據(jù)干細(xì)胞制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果,，確定其制劑的保存液成份與配方、保存及運(yùn)輸條件,、有效期,，同時(shí)確定與有效期相適應(yīng)的運(yùn)輸容器和工具，以及合格的細(xì)胞凍存設(shè)施和條件,。
 3.快速檢驗(yàn)方法的研發(fā)
 應(yīng)根據(jù)新的干細(xì)胞基礎(chǔ)及實(shí)驗(yàn)技術(shù)研究成果,，針對各自干細(xì)胞制劑的特性、特定的臨床適應(yīng)證,，研發(fā)新的快速檢驗(yàn)方法,，用于干細(xì)胞制備過程各階段的質(zhì)量控制和制劑的放行檢驗(yàn)。
 三.干細(xì)胞制劑的臨床前研究
 應(yīng)進(jìn)行干細(xì)胞制劑的臨床前研究,，為治療方案的安全性和有效性提供支持和依據(jù),。
 在臨床前研究方案中，應(yīng)設(shè)計(jì)和提出與適應(yīng)證相關(guān)的疾病動(dòng)物模型,，用于預(yù)測干細(xì)胞在人體內(nèi)可能的治療效果,、作用機(jī)制、不良反應(yīng),、適宜的輸入或植入途徑和劑量等臨床研究所需的信息,。
 應(yīng)在合適的動(dòng)物模型基礎(chǔ)上，研究和建立干細(xì)胞有效標(biāo)記技術(shù)和動(dòng)物體內(nèi)干細(xì)胞示蹤技術(shù),，以便于研究上述內(nèi)容,，特別是干細(xì)胞的體內(nèi)存活、分布,、歸巢,、分化和組織整合等功能的研究,。在綜合動(dòng)物模型研究基礎(chǔ)上，應(yīng)對干細(xì)胞制劑的安全性和生物學(xué)效應(yīng)進(jìn)行合理評價(jià),。
 鑒于干細(xì)胞治療的特殊性,，其臨床前的安全有效性評價(jià)具有較大難度和局限性，以下只提出一些基本的原則,，具體的研究方案可根據(jù)這些原則制定,。如進(jìn)行的相關(guān)研究工作與下述原則不符，應(yīng)提供相應(yīng)的依據(jù)和支持性資料,。
 （一）安全性評價(jià)
 1.毒性試驗(yàn)
 可通過合適的動(dòng)物試驗(yàn)?zāi)Ｐ陀^察干細(xì)胞制劑各種可能的毒性反應(yīng),，如細(xì)胞植入時(shí)和植入后的局部和整體的毒性反應(yīng)。
 如難以采用相關(guān)動(dòng)物評價(jià)人干細(xì)胞的毒性,，可考慮盡可能模擬臨床應(yīng)用方式,，采用動(dòng)物來源相應(yīng)的干細(xì)胞制劑，以高于臨床應(yīng)用劑量回輸動(dòng)物體內(nèi),，觀察其毒性反應(yīng),。
 2.異常免疫反應(yīng)
 對干細(xì)胞制劑特別是異體來源、經(jīng)體外傳代培養(yǎng)和特殊處理的自體或異體來源的制劑,，應(yīng)當(dāng)通過體外及動(dòng)物試驗(yàn)評價(jià)其異常免疫反應(yīng),，包括對不同免疫細(xì)胞亞型及相關(guān)細(xì)胞因子的影響。對胚胎干細(xì)胞及iPS細(xì)胞,，在體外誘導(dǎo)分化后重新表達(dá)供體的HLA抗原分子,，植入體內(nèi)后可能形成的免疫排斥反應(yīng)，需進(jìn)行有效評價(jià),。
 3.致瘤性
 對高代次的或經(jīng)過體外復(fù)雜處理和修飾的自體來源以及各種異體來源的干細(xì)胞制劑,，應(yīng)當(dāng)進(jìn)行臨床前研究階段動(dòng)物致瘤性評估。建議選擇合適的動(dòng)物模型,，使用合適數(shù)量的干細(xì)胞,、合理的植入途徑和足夠長的觀察期，以有效評價(jià)制劑的致瘤性,。
 4.非預(yù)期分化
 非預(yù)期分化包括非靶細(xì)胞分化或非靶部位分化,。建議利用特定的檢測技術(shù)，在體內(nèi)動(dòng)物試驗(yàn)中研究,、評估和監(jiān)控干細(xì)胞非預(yù)期分化的可能性,。
 （二）有效性評價(jià)
 1.細(xì)胞模型（見前述-干細(xì)胞制劑的質(zhì)量研究）
 2.動(dòng)物模型
 用于觀察植入的干細(xì)胞或其分化產(chǎn)物改變模型中疾病的病理進(jìn)程；研究干細(xì)胞的歸巢能力和免疫調(diào)節(jié)功能,；通過分析干細(xì)胞植入后,，特定細(xì)胞因子和/或特定基因表達(dá)情況，提出替代性生物學(xué)效應(yīng)標(biāo)志物,。
 若所申請的研究方案,，因目前國際上干細(xì)胞生物學(xué)知識和技術(shù)方面的局限性,，無法提出有效的體內(nèi)動(dòng)物模型研究內(nèi)容，則應(yīng)在臨床前研究報(bào)告中進(jìn)行全面細(xì)致的說明,。
 

名詞解釋：
 干細(xì)胞制劑（Stem cell-based medicinal products）：是指用于治療疾病或改善健康狀況的,、以不同類型干細(xì)胞為主要成分、符合相應(yīng)質(zhì)量及安全標(biāo)準(zhǔn),，且具有明確生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞制劑,。
 胚胎干細(xì)胞（Embryonic stem cell）：源自第5-7天的胚胎中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的初始（未分化）細(xì)胞，可在體外非分化狀態(tài)下“無限制地”自我更新,，并且具有向三個(gè)胚層所有細(xì)胞分化的潛力,，但不具有形成胚外組織（如胎盤）的能力。
 成體干細(xì)胞（Somatic stem cell）：位于各種分化組織中未分化的干細(xì)胞,，這類干細(xì)胞具有有限的自我更新和分化潛力,。
 間充質(zhì)干細(xì)胞（Mesenchymal stromal/stem cell， MSC）：一類存在于多種組織(如骨髓,、臍帶血和臍帶組織,、胎盤組織、脂肪組織等）,，具有多向分化潛力,，非造血干細(xì)胞的成體干細(xì)胞。這類干細(xì)胞具有向多種間充質(zhì)系列細(xì)胞（如成骨,、成軟骨及成脂肪細(xì)胞等）或非間充質(zhì)系列細(xì)胞分化的潛能,，并具有獨(dú)特的細(xì)胞因子分泌功能,。
 祖細(xì)胞（Progenitors）：一類只能向特定細(xì)胞系列分化,，并且只具備有限的分裂增殖能力的成體細(xì)胞。
 前體細(xì)胞（Precursors）：一類只能向特定終末分化細(xì)胞分化的,，較祖細(xì)胞更有限的增殖能力的成體細(xì)胞,。
 造血干細(xì)胞（Hematopoietic stem cell）：具有高度自我更新能力和多向分化潛能的造血前體細(xì)胞，可分化成紅細(xì)胞,、白細(xì)胞,、血小板和淋巴細(xì)胞。
 誘導(dǎo)的多能性干細(xì)胞（Induced pluripotent stem cell, iPS）：一類通過基因轉(zhuǎn)染等細(xì)胞重編程技術(shù)人工誘導(dǎo)獲得的,，具有類似于胚胎干細(xì)胞多能性分化潛力的干細(xì)胞,。
 胚胎干細(xì)胞系（Embryonic stem cell line）：在體外培養(yǎng)的條件下，可保持未分化狀態(tài)連續(xù)增殖的胚胎干細(xì)胞,。
 全能性（Totipotent）：是早期數(shù)天胚胎中,，具有分化成機(jī)體所有類型細(xì)胞和形成完全胚胎能力的干細(xì)胞。
 亞全能性（Pluripotent）：是具有形成機(jī)體各種類型細(xì)胞,，即所有三胚層來源細(xì)胞的能力,，但不具有形成胚外胎組織細(xì)胞的能力,。
 多能性（Multipotent）：是指具有形成機(jī)體內(nèi)超過一種類型細(xì)胞的能力，但往往是針對特定細(xì)胞系列的,。
 滋養(yǎng)層細(xì)胞（Feeder layer）：是指通過細(xì)胞-細(xì)胞相互作用,，或分泌蛋白或其他物質(zhì)，位于胚胎干細(xì)胞和iPS細(xì)胞的培養(yǎng)底層,，以支持這些干細(xì)胞生長的動(dòng)物源性或人源性細(xì)胞,。
 畸胎瘤（Teratoma）：一種含有三個(gè)胚層組織細(xì)胞和分化的組織的良性腫瘤。
 
 
 
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